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        技術文章/ article

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        • 2023-03-14

          在分子生物學和基因研究領域,質量和濃度是DNA和RNA樣本分析的重要參數。因此,為了確保實驗結果的準確性和重復性,并且避免一些不必要的錯誤或偏差,研究人員需要進行DNA和RNA樣本的準確測定和質量控制。其中,POD(Picodrop)測試盒是一種簡單易用、高靈敏度和高精度的測試工具。測試盒是一種基于端光學技術的微量樣品測試系統,可以快速、準確地測定DNA和RNA樣品的質量和濃度。其特色在于,它使用一種先進的平板式窄視角水滴成像技術,可以測定樣品體積范圍在0.5-2μL之間,濃...

        • 2023-03-10

          大分子抗原因其具有兩個以上的抗原決定簇,而可用雙抗體夾心法測定,小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3,T4及睪酮等激素因其只有一個抗原決定簇,從而無法使用雙抗夾心方法測定,只能采用競爭抑制法測定。具體步驟如下:1.先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2.同時加入待測樣本和酶標的小分子,溫育一定時間后洗板;此步中,待測樣本的小分子將與酶標小分子競爭與固相上特異抗體結合。3.加入酶底物,溫育顯色測定,顯色的強弱與待測樣本中的小分子含量成反比。這種測定模式...

        • 2023-03-02

          ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數據進行統計分析后確定的,其確定依據為判斷結果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內之外的測定結果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區"。“灰區"的大小可用統計學方法確定。測定結果處于“灰區"的樣本,可通過確認試驗或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區"是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。灰區的設置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內C(一般在15%~2...

        • 2023-02-27

          每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對應的說明書,而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例,為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中,將為您分析:為何ELISA實驗血清樣本都需要稀釋?在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:1)競爭抑制比較明顯,應稀釋競爭物;2)以降低非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關系也不大。不管你是用直接競爭還是...

        • 2023-02-27

          在ELISA試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。...

        • 2023-02-23

          熒光定量PCR試劑盒的操作步驟:1、取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。3、RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10...

        • 2023-02-20

          在ELISA試劑盒中通常有三次加樣步聚,即加標本,加酶聯絡物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質局部濃縮,散布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液,然后在微型轟動器上轟動1分鐘以bao證混和。通常說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超越一星期測定的需低溫冰存。可用作ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾...

        • 2023-02-14

          大分子抗原因其具有兩個以上的抗原決定簇,而可用雙抗體夾心法測定,小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3,T4及睪酮等激素因其只有一個抗原決定簇,從而無法使用雙抗夾心方法測定,只能采用競爭抑制法測定。具體步驟如下:1.先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2.同時加入待測樣本和酶標的小分子,溫育一定時間后洗板;此步中,待測樣本的小分子將與酶標小分子競爭與固相上特異抗體結合。3.加入酶底物,溫育顯色測定,顯色的強弱與待測樣本中的小分子含量成反比。這種測定模式...

        • 2023-02-10

          在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當。ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如...

        • 2023-02-07

          酶免試劑盒及酶聯免疫試劑盒,酶免試劑盒在實驗室已經相當普及,絕大部分的酶聯免疫試劑盒都是用來檢測未知樣本中抗原的濃度。今天深圳瑞清生物就與大家共享一些關于選購酶免試劑盒五步曲,助力您的科研實驗!希望能幫助到您!選購酶免試劑盒五步曲:第yi步、明確檢測何種蛋白。第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性合適。第三步、尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒。第四步、咨詢商家酶聯免疫試劑盒使用的抗體類型:多抗還是單抗?單抗是針對什么抗原決定簇的。第五步、做出自己的判斷該買哪個試劑盒。深...

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