植物腺苷二磷酸葡萄糖AGP測試盒ELISA試劑盒

植物腺苷二磷酸葡萄糖AGP測試盒ELISA試劑盒檢測原理：
試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 。往預先包被病毒性腹瀉病毒抗ti的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗原，經過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在suan的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450NM波長下測定吸光度(OD值) ，與CUTOFF值相比較，從而判定標本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.細胞上清液: 3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉 離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20°C， 避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀(450NM)
2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL
3.37℃恒溫箱
植物腺苷二磷酸葡萄糖AGP測試盒ELISA試劑盒操作注意事項：
1.試劑盒保存在2-8°C，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完quan溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。
3.預處理后的樣本請按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當稀釋以達到試劑盒的的最jia檢測效果。.
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。

常用方法：
1. 夾心法：
夾心法常用于檢測大分子抗原，一般的操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結
c. 洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗ti，與待測抗原進行鍵結
d. 洗去多余未鍵結一次抗ti，加入帶有酶的二次抗ti，與一次抗ti鍵結
e. 洗去多余未鍵結二次抗ti，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結果
原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標抗ti，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。
2. 間接法
間接法常用于檢測抗ti，一般的操作步驟為：
a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗ti，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。
c. 洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗ti，與待測的一次抗ti鍵結。
d. 洗去多余未鍵結二次抗ti，加入酶底物使酶呈色，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產物的含量即可測量待測抗ti的含量。
原理：利用酶標記的抗抗ti以檢測已與固相結合的受檢抗ti。
3. 競爭法
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：
a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結
c. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結，由于塑膠孔盤上固著的抗ti數量有限，因此當檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗ti就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗ti鍵結，即所謂競爭法之由來。
d. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。
e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原，或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時，一般會考慮使用競爭法ELISA。
免責聲明：
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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