ELISA試劑盒檢測血清的詳細留意事項

ELISA試劑盒檢測血清的詳細留意事項
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??ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。
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??在檢測時，受檢標本（測定其中的抗原）與固相載體表面的抗體反應。洗滌后加入酶標記的抗體，通過反應結合在固相載體上。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
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??1. 要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反應顯色。
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??2. 冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果，然后引起假陰性結果。此外，凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振蕩，重復倒置混勻即可。
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??3. 標本在保存中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時，應離心沉積后取上清檢測。
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??4. 樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的成長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定方法發生非特異性攪擾。
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??5. 血清標本如是以無菌操作別離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長期保存，應在-70℃以下。